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當(dāng)前位置:濟(jì)南九望儀器有限公司>>紫外可見分光光度計(jì)>> 紫外可見近紅外分光光度計(jì)
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更新時(shí)間:2021-08-16 08:46:50瀏覽次數(shù):572次
聯(lián)系我時(shí),請(qǐng)告知來自 包裝印刷網(wǎng)1、基本工作原理
1)吸收的本質(zhì):分光光度法是利用物質(zhì)對(duì)不同波長光的選擇吸收特性而建立起來的分析方法。通常利用棱鏡或光柵分光來取得單色光,使單色光連續(xù)地依次通過溶液,并測得該溶液對(duì)每一波長的吸收,得到吸收光譜曲線。吸收光譜來源于物質(zhì)對(duì)光的選擇吸收,這是物質(zhì)的宏觀現(xiàn)象,而吸收的本質(zhì)
是分子內(nèi)部運(yùn)動(dòng)和光相互作用的結(jié)果。當(dāng)物質(zhì)的分子吸收一定能量或波長的光譜后,透過的光譜中有些波長被吸收就形成了吸收光譜。吸收的能量愈小,則相應(yīng)的光的波長,吸收峰出現(xiàn)在較長波段。當(dāng)吸收在紅外區(qū)時(shí)形成紅外吸收光譜,如果吸收能量愈大,則相應(yīng)的波長愈短,吸收峰出現(xiàn)在較短波段,當(dāng)吸收在紫外區(qū)產(chǎn)生紫外吸收光譜。
2)吸收定律—朗伯比耳定律:當(dāng)一束平行單色光通過均勻的溶液時(shí),其吸光度與溶液的濃度和厚度的乘積成正比。其數(shù)字表達(dá)式:A=KCL=LogI0/I=-LogT吸收定律數(shù)字表達(dá)式成立的前提:①,入射光為單色光,②,吸收過程中各物質(zhì)無相互作用,各物質(zhì)吸光度具有加和性,③,光與物質(zhì)的作用于吸收過程,沒有熒光散射和光化學(xué)現(xiàn)象,④,吸收物是一種均勻分布的連續(xù)體系,
3)影響分光光度法的原因:
a,輻射與物質(zhì)的非吸收作用引起的誤差,
b,熒光與光化學(xué)反應(yīng)的影響,一般說來,熒光對(duì)分光光度測量產(chǎn)生的誤差可以忽略,多數(shù)情況下顯色體系的熒光效率很小,而且熒光發(fā)射是各向同性,只
有一小部分沿著透射光方向進(jìn)入檢測器,使測量吸光度偏低,產(chǎn)生負(fù)偏離。熒光對(duì)吸收測量的影響極大程度上決定于儀器的吸收池和檢測器光學(xué)設(shè)計(jì),
c,反射和散射,吸收定律只適用于均勻介質(zhì)的吸收體系,渾濁溶液因散射使實(shí)測吸光度增加,導(dǎo)致偏離比耳定律,
d,儀器的非理想性引起的誤差,
e,復(fù)色光對(duì)比耳定律的偏離,大多數(shù)光度計(jì)只能獲得接近于單色光的狹窄的光通帶,實(shí)際上仍是有復(fù)色光性質(zhì),可導(dǎo)致偏離比耳定律。偏離的大小取決于二單色光的摩爾吸光系數(shù)差△ε,|△ε|很小時(shí),可近似認(rèn)為是單色光,在低濃度時(shí),工作曲線仍為直線,但濃度較大時(shí),隨濃度增大,A-C曲線彎曲愈嚴(yán)重,故比耳定律只適用于稀溶液,
f雜散光,雜散光是指進(jìn)入檢測器的處于待測波長光譜帶寬范圍外的不需要的其它波長組分。其主要來源于分光光度計(jì)色散元件棱鏡或光柵、反射鏡、透鏡表面的散射,單色器內(nèi)壁灰塵及其它元件傷痕的反射和漫射等,雜散光可引起嚴(yán)重的測量誤差。在儀器能量處于最小的波長處,雜散光通常處于值(如氘燈220nm,鎢燈340nm),
g,狹縫寬度,狹縫寬度不僅影響光譜的純度,也影響吸光度值。在定量分析時(shí),為了得到足夠的測量信號(hào),應(yīng)采用較大的狹縫,在定性分析時(shí)則采用較小的狹縫,當(dāng)出射狹縫和入射狹縫的寬度相等時(shí),狹縫寬度引起的誤差最小
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